宋雅梅，李智（中国医科大学基础医学院天然药物研究室 目的：观察防己黄柏凝胶的镇痛抗炎药理作用。 方法：采用小鼠热板法和扭体法镇痛实验观察防己黄柏凝胶的镇痛作用，观察对小鼠毛细血管通透性、大鼠白细胞游走的影响，并结合小鼠巴豆油耳肿胀与大鼠佐剂性关节炎实验观察其抗炎作用。 结果：防己黄柏凝胶能显著提高小鼠痛阈，降低毛细血管通透性，抑制由巴豆油及角叉菜胶所致的炎症反应；可显著减轻佐剂性关节炎大鼠足跖原发性肿胀。 结论：防己黄柏凝胶有明显的镇痛和抗炎作用。 关键词：防己黄柏凝胶；透皮给药；抗炎；镇痛 防己黄柏凝胶是在传统方剂基础上，采用现代制剂技术开发的治疗骨性关节炎、风湿性关节炎等疾病所致滑膜炎的新型透皮给药剂型。本实验研究了防己黄柏凝胶的镇痛和抗炎等药理作用，现报道如下。 1实验材料 1.1药物防己黄柏凝胶（自制）：将卡泊姆和聚乙烯吡咯烷酮加入到适量的蒸馏水中，充分溶胀，加入甘油、丙二醇、月桂氮卓酮研磨使湿润，加三乙醇胺研磨成透明凝胶基质，水浴至70℃。取防己、黄柏浸膏粉、冰片细粉、丙二醇、吐温-80适量混合加热溶解后，将上述药液加入到基质中，加蒸馏水，继续搅拌均匀，得棕黄色半透明凝胶剂。 扶他林乳膏：北京诺华制药有限公司，批号：051921.2实验动物Wistar大鼠，雌雄兼用，体重（180?20）g；昆明小鼠，雌雄兼用，体重（20?2）g，均由辽宁中医学院科研处实验动物中心提供。 2实验方法 2.1小鼠热板法镇痛实验 取雌性小鼠，放入（55±0.5）℃热板水浴中，以舔后足作为疼痛反应指标，预测小鼠痛阈值。以5s<痛阈值<30s视为合格小鼠，将痛阈合格的40只小鼠随机分为5组；第1组为等剂量的赋形剂对照组，剂量为2g赋型剂/kg；第2组为阳性对照药扶他林乳膏组，剂量为0.4g/kg；第3组为防己黄柏凝胶大剂量组，剂量为0.12g生药/20g（6g生药/kg）；第4组为中剂量组，剂量为0.08g生药/20s（4g生药/kg）；第5组为小剂量组，剂量为0.04g生药/20g（2g生药/kg）。将药物涂于小鼠尾根部，面积为1cm2，用不致敏透明胶带覆盖，每天给药1次，连续给药7天，于末次给药后0.5h，1h，1.5h分别测定痛阈值。 2.2小鼠扭体法镇痛实验 取体重18~2.2g健康小鼠40只，雌雄各半，随机分为5组，分组及给药方法同2.1。于第7天腹腔注射0.6%醋酸0.2mL/只，同时用秒表计时，记录小鼠出现第1次扭体反应的时间（即潜伏期）及15min内各鼠的扭体次数。 药物镇痛的抑制率=（对照组扭体次数-给药组扭体次数）/对照组扭体次数×100%。 2.3对小鼠毛细血管通透性影响的实验 取体重18~22g健康小鼠40只，雌雄各半，随机分为5组，分组及给药方法同2.1。第8天，每只小鼠尾静脉注射1%伊文思蓝0.1mL/只，并同时腹腔注射0.6%醋酸0.2mL/只，20min后断头处死，剪开腹腔，用5mL蒸馏水冲洗腹腔3次，用吸管吸取腹腔洗出液约4mL，1000r/min离心5min，取上清液3mL在751分光光度计500nm处测定吸收度（OD值）。 2.4小鼠巴豆油耳肿胀实验[1]取健康18~22g雄性小鼠40只，分组与给药同2.1。第8天每只小鼠右耳廓前后均匀涂布当日配制的巴豆油合剂，0.1mL/只，致炎4h后将小鼠脱颈椎处死，用直径9mm的角膜环钻切下左右耳廓，分别在电子天平上称重后，计算耳肿胀率。耳肿胀率=（右耳重量-左耳重量）/左耳重量×100%。 2.5对大鼠白细胞游走影响的实验 取雄性Wistar种大鼠40只，体重（180±20）g，随机分为5组：第1组为等剂量赋形剂组（0.4g赋形剂/200g体重）；第2组为扶他林对照组，剂量为0.4g/kg；第3组为防己黄柏凝胶大剂量组，剂量为1.2g生药/200g体重；第4组为中剂量组，剂量为0.8g生药/200g体重；第5组为小剂量组，剂量为0.4g生药/200g体重。大鼠背部脱毛面积为4cm2，在脱毛部位涂布凝胶，用不致敏透明胶带覆盖，每天1次，连续给药7天，第8天用乙醚麻醉大鼠，左侧胸腔注入2%角叉菜胶Carrageenan（25mg/kg），24h后放血处死，剖开胸腔，用吸管吸取胸腔渗出液20μL，加入0.38mL的白细胞稀释液中，按白细胞记数法计数胸腔液中白细胞的数量。 2.6大鼠佐剂性关节炎实验 取雌性Wistar种大鼠40只，体重（180±20）g，随机分为5组，分组与给药同2.5。连续给药6天，第3天用自制的坐标纸条尺测量大鼠右侧足跖部周径，然后每只大鼠右后足跖皮内注射不完全弗氏完全佐剂30μL致炎，致炎后第6、18和72h分别测量右侧足跖部周径，计算足肿胀度。足跖肿胀率=（致炎后足跖周径-致炎前足跖周径）/致炎前足跖周径×100%。 2.7统计学方法统计数据以…X±s表示，统计方法用Dunnett检验法。 3结果 3.1防己黄柏凝胶对热板法致痛小鼠痛阈的影响结果见表1。 结果表明，防己黄柏凝胶大、中剂量能显著提高小鼠痛阈值。 3.2防己黄柏凝胶对醋酸致痛小鼠的镇痛作用结果见表2。 结果表明，防己黄柏凝胶各剂量组均能延长小鼠疼痛潜伏期，并能降低小鼠的扭体次数，具有明显的镇痛作用。 3.3防己黄柏凝胶对小鼠毛细血管通透性的影响结果见表3。 结果表明，防己黄柏凝胶各剂量组均能降低小鼠毛细血管通透性，减少炎性介质的渗出，具有明显的抗炎作用。 3.4防己黄柏凝胶对小鼠巴豆油耳肿胀的抑制作用结果见表4。 结果表明，防己黄柏凝胶大、中剂量能明显抑制由巴豆油引起的小鼠耳廓肿胀。 3.5防己黄柏凝胶对大鼠白细胞游走的影响结果见表5。 结果表明，防己黄柏凝胶可明显抑制角叉菜胶所致的炎症反应，降低白细胞数目。 3.6防己黄柏凝胶对佐剂性关节炎的抑制作用结果见表6。 结果表明，防己黄柏凝胶预防性用药可显著减轻佐剂性关节炎大鼠足跖原发性肿胀。 4讨论 凝胶剂系指药物与能形成凝胶剂的辅料制成均一、混悬或乳剂型的乳胶稠厚液体或半固体制剂，适用于皮肤、黏膜及腔道。该剂型避免了口服给药存在的首过效应，还可以减轻药物的毒副作用，并且符合中医“内病外治”的理念。防己黄柏凝胶主要由防己、黄柏两味药物组成，防己行水，泻下焦湿热；黄柏清热燥湿、泻火解毒，二者相伍共同起到行水消肿、清热止痛之功效；冰片可消肿止痛，又为方中使药，使方中主药药达病所。现代药理研究表明防己中的主要药效成份）粉防己碱能降低炎症细胞游离钙浓度，增加炎症细胞cAMP的浓度；明显降低前列腺素E2（PGE2）和白三烯B4（LTB4）的合成，抑制中性粒细胞（Neu）游出，降低血管通透性发挥抗炎作用。 实验表明该药通过阻断中枢性钙通道而起到中枢性镇痛作用，同时也具有外周性镇痛作用。实验研究表明黄柏提取物可显著提高吞噬细胞的吞噬功能，对二甲苯诱发的小鼠耳廓炎症有明显的抑制作用。本凝胶的药效学研究表明，该药具有显著的镇痛、抗炎作用，具有良好的开发临床应用前景。 参考文献：略 |
