防己茯苓汤抗炎镇痛作用的实验研究 田婧 目的:研究防己茯苓汤的抗支镇痛作用。 方法:采用热板法、醋酸扭体法镇痛实验模型,二甲苯致小鼠耳肿胀、大鼠毛细血管通透性、大鼠棉球内芽肿、大鼠蛋清性关节炎、大鼠炎性组织中PGE2:含量等炎症模型,研究防己茯苓汤的抗炎镇痛作用。 结果:动物实验表明防己茯苓汤对二甲苯、蛋清所致惠性炎症有明显抑制作用,托降低大鼠的毛细血管通透性,抑制棉球肉芽肿增生,提高小鼠痛闺值,减少醋酸所致小鼠扭体次数。并能显著降低炎症组织中PGE的含量。 结论:将防己茯萃汤用于抗交镇搞作用的研究,发现其碗有明显的抗芟镇痛作用,并能显著降低更症组织中PC.E2的含量。 关键词:防己茯苓汤;抗交;镇痛 防己茯苓汤是《金匮要略》中治疗水肿的有名经方,由防已9g、黄芪9g、桂枝9g、茯苓18g、甘草6g组成,具有益气、健脾、利水的功效。临床用于治疗水肿、慢性充血性心力衰竭、房颤、痛风性关节炎等。但目前该方抗炎镇痛的报道较少。本文根据该方特点对该方的抗炎镇痛作用进行实验研究,以探讨防己茯苓汤治疗风湿性疾病的药理学基础。 1材料与方法 1.1实验动物SD纯种大鼠,雌雄兼用,体重170-2509;昆明种小鼠,雌雄兼用,体重(20±2)g,均由天津中医药大学实验动物中心提供。 1.2仪器与试剂 FA2004A型电子天平(上海精天电子仪器有限公司),HH-601超级恒温水浴(金坛市金城国胜宴验仪器厂),XMT-921A远红外恒温干燥箱(天津市华北实验仪器有限公司),712分光光度计,754-紫外分光光度计。 1.3药品与试剂 防己、茯苓、桂枝、黄芪、甘草(由天津中医药大学中药标本馆提供),l%伊文斯蓝,100%二甲苯,0.6%醋酸溶液,吗啡,安痛定,生理盐水,乙醚,新鲜鸡蛋清,组胺,1%角叉菜胶,甲醇,0.5mol/L KOH-甲醇溶液。 1.4镇痛实验 1.4.1热板法实验 取雌性小鼠,随机分5组,每组10只,分别腹腔注射生理盐水(10mL/kg)、吗啡(0.01g/kg)、防己茯苓汤(2、4、6g/kg),测量给药后15、30min小鼠的痛闽值。 1.4.2醋酸扭体法实验 取小鼠50只,雌雄各半,分别灌胃生理盐水(10mL/kg)、安痛定(10mg/kg)、防己茯苓汤(2、4、6g/kg)。给药后1h于腹腔注射0.6%冰醋酸0.1mL/10g,记录注射15min内每只小鼠的扭体反应次数。 1.5抗炎实验 1.5.1二甲苯致小鼠耳肿胀实验 取小鼠50只,雌雄不拘,随机分5组,每组10只,分别灌胃给药生理盐水(10mL/kg)、可的松(0.1g/kg)、防己茯苓汤(2、4、6g/kg)给药1h后,用二甲苯(O.06mL/只)涂于小鼠右耳致炎,30min后处死小鼠,剪下双耳,用直径为8mm圆型打孔器取下双耳对称处的耳片称重。以两耳片重量差作为肿胀度,计算各组抑制率。 1.5.2大鼠棉球肉芽肿实验 取SD大鼠50只,雌雄各半。随机分5组,每组10只。参照文献方法造模,乙醚麻醉后,于两侧腹部皮下各植入30mg重的灭菌棉球1个。术后次日开始灌胃给药,给药剂量同1.5.1,每天给药1次.8天后处死动物,剥离棉球肉芽组织,烘干称重,减去原棉球的重量,净得肉芽重量。 1.5.3大最蛋清性足肿胀实验 取SD大鼠50只,雌雄各半,随机分为5组,每组10只,给药剂量同1.5.1,灌胃给药8天,于末次给药后1h将鲜蛋清注人大鼠(0.1mL/只)右踝关节皮下,用卡尺在3h后测量踝关节周长之差为指标,计算肿胀程度。 1.5.4大鼠毛细血管通透性实验 取SD大鼠50只,随机分5组,每组10只,给药同1.5.1。给药2h后,每只鼠背部皮下注射200mg组胺,并于鼠尾静脉注射1%Evans蓝0.4ml/100g,30min后.断头处死大鼠,剥皮测着色皮斑面积,然后,用712-分光光度计测定吸收度(波长610nm)。 1.5.5太鼠炎性组织中PCE2台量实验 取SD大鼠50只,分组、给药同1.5.1。于给药0.5h后,在右后足跖皮下注射1%角叉菜胶0.1mL,造成炎症,5h后处死大鼠,剪下炎性肿胀足,用生理盐水浸泡1h,取出足爪,离心浸泡液,吸取上清液0.1mL,加0.5mol/L KOH-甲醇溶液2mL,在50度下异构化20min,用甲醇稀释至20mL,用754紫外分光光度计测定密度(OD)值。 1.6数据处理 实验数据采用x平均±s表示,两样本均数比较用t检验,多样本均数比较用单因素方差分析,如有统计学意义采用两两比较q检验,数据用SAS6.0软件进行处理,P<0.05为差异有显著性,P<0.01为差异有极显著性。 2结果 2.1对小鼠痛闻值的影响(热板法)结果表明,防己茯苓汤组和吗啡组均有一定的镇痛作用;其中以防己茯苓汤3组30min和吗啡组15min及30min的镇痛作用较为明显。结果见表1。 2.2对醋酸所致小鼠扭体反应的影响结果表明,各治疗组均能不同程度地减少小鼠的扭体次数,对醋酸所致小鼠扭体反应均有明显抑制作用,结果见表2。 2.3防己茯苓汤对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响结果表明.各实验组均能不同程度地抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀,其中可的橙组和防己茯苓汤3组作用比较明显,结果见表3。 2.4防己茯葶汤对大鼠棉球内芽肿组织增生的影响结果表明,防己茯苓沥2组、3组对大鼠棉球性肉芽肿有明显的抑制作用.P<0.05,结果见表4。 2.5防己萑葶茹对太鼠蛋清性关节炎的影响结果表明,可的松组、防己茯苓场2组、3组均能不同程度地抑制鸡蛋清所致太鼠关节肿胀。以防己茯苓汤3组作用最强,防己获苓汤3组、可的松组均有显著性差异,结果防己茯苓汤对大鼠蛋清性关节炎有明显的抑制作用,P<0.05.见表5。 2.6防已茯苹汤对大鼠毛细血管通透性的影响结果表明,可的松组、防己茯苓汤2组、3组均有不同程度降低毛细血管通透性的作用,防己茯苓汤2组、3组没有显著性差异。结果见表6。 2.7防己茯苓汤对大鼠麦性组织中PGE2含量的影响结果表明,可的松组、防己茯苓汤组均有不同程度减少大鼠炎性组织PGE2的含量的作用,防己茯苓汤能明显减少大鼠炎性组织PGE2的含量P<0.05(见表7)。 3讨论 本实验结果表明,防己茯苓汤有明显的抗炎作用,对二甲苯、蛋清所致急性炎症有明显抑制作用,能降低大鼠的毛细血管通透性,抑制棉球肉芽肿增生;在镇痛方面采用小鼠因热刺激致痛,明显提高小鼠痛阈值,减少醋酸所致小鼠扭体次数,并能显著降低炎症组织中PG
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